用兩種方法檢測乙肝表面抗原結果分析

目的

了解用

ELISA

法檢測乙肝表面抗原和用化學發光法檢測表面抗原兩者

之間的結果情況。方法

采集

320

例就診人員的血液標本，分別用化學發光法與

ELISA

法檢測。

結果

320

份標本中，

發光法檢測出

40

份陽性，

280

份陰性。

ELISA

法檢測出

42

份陽性，

278

份陰性。經

χ2

檢驗兩者無顯著性差異（

P>0.05

）

。結論

ELISA

法成本比較低，耗時長，

實驗的影響因素比較多，易出現假陽性?；瘜W發

光法成本高，所需時間短，干擾因素少，不易出現假陽性。

標簽：乙肝表面抗原；

ELISA

；化學發光

流行病學調查結果顯示，

我國的乙型病毒肝炎感染性約達

10%

，

乙肝的實驗

檢測對其防治具有非常重大的意義

[1]

。乙型肝炎病毒乙肝表面抗原（

HBsAg

）

是乙肝病毒的外殼蛋白，它可存在于患者的血液、唾液、乳汁、汗液、淚水、鼻

咽分泌物、

精液及陰道分泌物中。

隨著科學越來越進步，

檢測的手段也越來越多。

自

20

世紀

70

年代至今，

諸多高敏感性的檢測方法被廣泛應用于臨床免疫學的檢

測中，

當中應用最為廣泛的就屬酶聯免疫法

（

enzyme linked Immunosor bent assay

，

ELISA

）

[2]

。

近幾年，

化學發光微粒子免疫分析法

（

chemiluminescent microparticle 

immunoassay

，

CMIA

）正逐漸發展，是一種敏感性較強的臨床免疫學檢測方法，

有效解決了低濃度乙型肝炎病毒乙肝表面抗原的檢測難題

[3]

?，F用

ELISA

法，

化學發光法，這兩種方法檢測的相關性進行探討。

1 

資料與方法

1.1

一般資料

標本來自于我院

2016

年

3

月

1

日～

3

月

5

日體檢人員，

共

320

例，男

198

例，女

122

例，年齡

18

～

72

歲，平均年齡為（

39.5±

8.4

）歲。

1.2

標本采集

用紅頭采血管，

真空抽取靜脈血

3 ml

，

標本靜置后離心提取血

清。

1.3

檢測試劑與儀器

一種采用雅培化學發光

HBsAg

定量檢測試劑盒，標本

離心后，按照雅培

I2000

化學發光儀的操作規程檢測。試劑源自美國雅培公司，

批準文號為

70318HN00

，儀器為美國雅培公司生產的

i2000r

化學光分析儀。另

一種采用英科新創

HBsAg

酶聯免疫吸附試劑盒，安圖酶標儀，按照說明書的操

作步驟進行。試劑

由

英科新

創

（廈門

）

科技有限

公司提

供，批準文

號為

2008095514

，主要儀器為酶標儀（型號：伯樂

680

）

、恒溫水浴箱（生產企業：

上海博訊公司醫療器械廠）

。

1.4

結果陽性的判讀

化學發光法檢測含量

>0.05

為陽性。

ELISA

法：檢測標

本的

OD

值

/0.105>1

為陽性。

2 

結果

320

份標本，

ELISA

法檢測出

278

份陰性，

42

份陽性，

其中

40

份陽性的

OD

值

>0.5

，

2

份標本的

OD

值

<0.5

?；瘜W發光法檢測出

40

份陽性，其中

ELISA

法

檢測的那

2

份

OD

值

<0.5

的陽性標本檢測為陰性。最后再用

ELISA

法重新檢測

這兩份標本，結果最終顯示又為陰性，與化學發光法結果相符。

3 

討論

ELISA

法檢測

HBsAg

是標本中存在的乙肝表面抗原與固相載休表面的抗體

相結合，

放入恒溫箱，

通過一段時間的反應，

再進行洗滌拍干后加入酶標記的抗

體，反應一定時間后，再進行洗滌拍干，最后加顯色劑，與固相載體表面復合物

相反應，

如果存在乙肝表面抗原抗體復合物就會出現一定的顏色反應，

呈現陽性。

化學發光法將待測標本與生物素標記的單克隆抗體、

三氯聯吡啶釕標記單克隆抗

體、

鏈酶親和素標記磁性微粒加入到反應杯中共同溫育，

形成磁性微珠包被抗體

-

抗原

-

發光劑標記抗體復合物。經儀器內的緩沖液沖洗，當磁性微粒流經電極表

面時，

被安裝在電極下的磁鐵吸引住，

而游離的發光劑標記抗體被沖走。

同時在

電極加電壓，啟動電化學發光反應，使發光試劑標記物三氯聯吡啶釕和

TPA

在

電極表面進行電子轉移，產生電化學發光，光的強度與待測抗原的濃度成正比。

全自動化學發光法所有的操作控制由儀器操作，

具有靈敏度，

準確率高，

無輻射

及快捷方便等優點

[4]

，避免了各種交叉污染，標本加錯的可能性，避免了溫度，

時間控制偏差等。在

ELISA

法測定中影響因素較多，操作中的各個環節對試驗

的檢測結果影響較大，

在臨床檢驗中除正常反應外，

有時?？梢姷揭恍╁e誤的結

果（即假陽性或陰性結果）

[5]

。如在人工加標本，加酶結合物，加底物，可能

產生氣泡或濺出等人為的不當操作，

特別是洗滌在

ELISA

中決定著實驗的成敗，

標本中的非特異性的干擾物質吸附于固相載體上后，

如果沒洗脫掉，

就會產生假

陽性，錯誤的結果。

320

份標本中兩種方法檢測雖沒有顯著性差異，但有

2

份標本結果不相符，

通過

ELISA

法一旦報告給患者，就會引起多方面的麻煩?；瘜W發光法雖所需時

間短，干擾因素少，不易出現假陽性，但成本高。由于

ELISA

法成本比較低，

檢測的價格便宜，雖耗時長，實驗的影響因素比較多，易出現假陽性，但大多數

健康體檢人員還是比較喜歡采用此種方法。

所以作為臨床檢驗人員在操作的過程

中一定要仔細，

不得馬虎，

對于像這種

OD

值

<0.5

標本一定要重新檢測，

排除人

為因素。

綜上所述，在乙型肝炎病毒乙肝表面抗原的檢測上，

ELISA

法成本比較低，

耗時長，實驗的影響因素比較多，易出現假陽性?；瘜W發光法成本高，所需時間

短，干擾因素少，不易出現假陽性。

參考文獻：

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低水平

HBsAg3

種方法檢測結果比較

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檢驗

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[2]

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法檢測乙肝表面抗原出現假陽性結

果分析

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高麗欽，

林曉麗

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法檢測乙型肝炎表面抗原假陽性的影響

因素

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醫學信息，

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[5]

遲婉利，

孔祥民

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檢測乙肝病毒表面抗原假陽性原因分析

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中國誤

診學雜志，

2011

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11

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9

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：

2050-2050.

編輯

/

哈濤