標題：

乙型肝炎病毒表面抗原檢測

（

ELISA

）

版本號：

A 

修訂號：

01 

文件編號：

001 

發布日期：

2011

年

11

月

30

日

生效日期：

2011

年

11

月

30

日

發布部門：管理層

編制人：

審核人：

批準人：

12 

乙型肝炎病毒表面抗原檢測（

ELISA

）

1

原理：

在微孔板上預包被被純化的乙肝表面抗體

（

HBsAb

）

，

配

以酶標記抗體

（

HbsAb-HRP

）

及

TMB

等其它試劑，

采用夾

心法原理檢測人血清（或血漿）中乙肝表面抗原（

HBsAg

）

。

2

試劑：

2.1

試劑名稱：乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（酶聯

免疫法）

2.2

試劑生產廠家：英科新創（廈門）科技有限公司

2.3

包裝規格：

96Test/Kit 

2.4

試劑盒組成：

HbsAb

預包被微孔板（包被

HbsAb

）

，

HbsAg

酶標抗體（含

HRP

標記

HbsAb

）

, 

HbsAg

陽性對

照

（含基因工程

HbsAg

）

，

HbsAg

陰性對照

（正常人血清）

，

HbsAg

樣品稀釋液（含

BSA

緩沖液）

，濃縮洗滌液（

PBS-T

緩沖液）

，底物

A

（含

H2O2

）

，底物

B

（含

TMB

）

，終止液

（含

H2SO4

）

，封板膜，自封袋，說明書。

2.5

試劑儲存條件及有效期：

2~8

℃避光保存，有效

12

個月。

3

樣本采集：

取靜脈血

3-4ml

于干凈容器中分離出血清或血漿標本，

如不及時測定可置于

4

℃冰箱保存，如長期保存需置于

-15

至

-20

℃凍存，并避免樣本反復凍融。高脂血、高膽紅素及

標題：

乙型肝炎病毒表面抗原檢測

（

ELISA

）

版本號：

A 

修訂號：

01 

文件編號：

001 

發布日期：

2011

年

11

月

30

日

生效日期：

2011

年

11

月

30

日

發布部門：管理層

編制人：

審核人：

批準人：

13 

溶血樣本可能會影響試驗結果的準確性，建議不使用。

4

所需儀器

4.1

全自動酶免分析儀

4.2

新鮮蒸餾水或去離子水

4.3

酶標儀（單波長

450nm

或雙波長

450nm/630nm

）

4.4

微量移液器

4.5 37

℃恒溫箱或水浴箱

4.6

洗板機或洗瓶

5

檢驗方法

5.1

平衡：將試劑盒各組分從盒中取出，平衡至室溫

（

18~25

℃）

，微孔板板開封后，余者即時以自封袋封存。

5.2

配液：濃縮洗滌液配置前充分搖勻（如有晶體應充分

溶解）

，

濃縮洗滌液和蒸餾水去離子水按

1

：

19

稀釋后使用。

5.3

編號：取所需數量微孔條固定于支架，按序編號。

5.4

稀釋：每孔加入

20ul

樣品稀釋液。

5.5

加樣：分別在相應孔中加入

100ul

陰、陽性對照血清

或待測樣本。

5.6

溫育：置

37

℃溫育

60min

。

5.7

加酶：分別在每孔中加入酶標記抗體

50ul

。

5.8

溫育：置

37

℃溫育

30min

。

5.9

洗滌：用洗滌液充分洗滌

5

次、洗滌后扣干（每次應

保持

30~60s

的浸泡時間）

。